显微镜下再漂亮的一张图
前提是它切在正确的位置上!
一张粉紫色的图:螺旋、同心、一圈套着一圈。
第一次看到它的人,十个里有九个会先愣一下——这是蜗牛壳?还是谁把一盘蚊香放进了显微镜?
都不是。那是一段大鼠的肠管,被人一圈一圈卷紧,再横着切下的一刀。
【肠道(瑞士卷)】左 HE、右 Masson。同心螺旋的每一圈,都是同一段肠管在不同位置的管壁。 这张图在病理学里有个好记的名字——Swiss roll,瑞士卷。做法是:把整段肠管冲洗干净、铺平,从一端起像卷蛋糕卷一样卷紧,固定后切片。 这道工序没有仪器代劳。卷松了,圈间留缝,切片时容易散;卷得太紧,绒毛被压变形。松紧一致,靠的是手感。 这一方法最早由 Moolenbeek 与 Ruitenberg 于 1981 年系统描述,此后成为啮齿类肠道组织学研究的通行做法。 骨:脱钙是一场走钢丝 骨组织含大量钙盐,直接上切片机,不是把组织压碎,就是把刀口撕出毛边。所以必须先脱钙——脱得不够,组织切不动;脱过了头,结构和染色一并受损。脱到"切得动、形态还在"的临界点,才轮到切片机上场。 【骨】左 HE、右 Masson。长骨纵切面可同时覆盖关节端、骨干与骨髓腔;HE 可用于评估皮质骨、松质骨、骨小梁与骨髓腔结构,Masson 可用于评估骨基质与软骨中的胶原分布。 眼球:一层套一层的精密结构 眼球为多层嵌套的精密器官,角膜、前房、虹膜、晶状体、视网膜、巩膜依次排布,实验可根据研究目标,针对性观察目标区域组织。晶状体蛋白致密,是眼球制片中的难点组织,在样本处理过程中易发生组织分离。 【眼球】左 HE、右 Masson。HE 可用于评估角膜、前房、虹膜、视网膜与巩膜的层次结构;Masson 可用于评估巩膜、角膜等致密胶原层的结构完整性。 下面每一张切片,都来自同一只大鼠、同一批组织、同一套制片参数。 【心脏】HE:心肌纤维排列与走行、心肌细胞形态、心内膜与瓣膜结构、炎性细胞浸润。Masson:心肌间质胶原、血管周围纤维化与心外膜胶原——纤维化评价常用。 【肝脏】HE:肝小叶结构、肝细胞形态与排列、中央静脉与汇管区、炎性浸润。Masson:汇管区与中央静脉周围胶原分布,观察肝纤维化程度。 【肾脏】HE:肾小球、肾小管、肾间质与肾盂结构,皮质与髓质分界。Masson:肾间质胶原沉积与肾小球硬化程度。 【肺】HE:肺泡结构、肺泡间隔厚度、支气管上皮与血管壁。Masson:肺泡间隔与支气管周围胶原沉积,观察肺纤维化程度。 【支气管】HE:黏膜上皮与纤毛、黏膜下腺体、软骨环的完整性与层次。Masson:管壁软骨与结缔组织分布。 【脾】HE:白髓(脾小体)与红髓的结构与比例,脾脏免疫组织结构。Masson:脾纤维支架与血管周围胶原分布。 【脑】脑冠状面切面概览。HE:皮层、海马与脑室的整体轮廓。Masson:脑膜与血管周围胶原分布。概览用图,高倍细节需另行采集视场。 【肾上腺】HE:皮质各带(球状带、束状带、网状带)与髓质的分区结构、被膜完整性。Masson:被膜与间质胶原分布。 【睾丸】HE:生精小管结构、生精上皮的细胞层次与管腔形态——生精功能评价常用。Masson:生精小管间质与血管周围胶原沉积。 【附睾】HE:附睾管上皮结构与管腔内精子数量及成熟情况。Masson:管壁平滑肌与间质胶原分布。 【皮肤】HE:表皮、真皮与皮下组织的分层结构,以及毛囊、皮脂腺等附属器。Masson:真皮胶原纤维密度与排列——损伤修复与纤维化评价常用。 【肌肉】HE:肌纤维排列、肌束结构与横纹形态,肌纤维损伤与炎性浸润。Masson:肌纤维间质的胶原沉积,观察肌肉纤维化程度。 承接范围:大鼠、小鼠、豚鼠、兔、犬、猪等各类实验动物的全脏器病理检测,以及人体组织样本。 染色方案:H&E(常规形态学)|Masson(胶原纤维)|PAS(糖原 / 黏液)|油红 O(脂质沉积)|Tunel(细胞凋亡) 什么时候会用到我们 - 药物安全性评价的终末取材:多脏器全组织学检查,出具可直接引用的中文分析报告 - 疾病模型验证:确认造模是否成功,评估靶器官损伤程度与范围 - 课题结题与数据补充:已有组织块、需要补做切片或补做染色 - 疑难样本:含骨样本的脱钙切片、大动物脏器、人体组织样本 - 已有切片的问题处理:复染、重切、结果复核与报告解读 取材与阅片的依据 我们的脏器取材方向参照《Revised Guides for Organ Sampling and Trimming in Rats and Mice》(RITA 与 NACAD 工作组联合发布,2003–2004):同一只动物的心脏、肾脏、脑等脏器,均按固定解剖标志切取,切面方向统一——只有切在同一个切面上,不同批次、不同实验室的数据才具备可比性。阅片由至少两名病理专业人员独立承担,并对实验分组保持盲态,配合初审与复审的双人复核。 从活体组织到中文分析报告,每一个环节都会被记录、被复核。 主要参考文献 Moolenbeek C, Ruitenberg EJ. The "Swiss roll": a simple technique for histological studies of the rodent intestine. Lab Anim. 1981;15(1):57–59. Ruehl-Fehlert C, Kittel B, Morawietz G, Deschl U, et al. Revised guides for organ sampling and trimming in rats and mice – Part 1: A joint publication of the RITA and NACAD groups. Exp Toxicol Pathol. 2003;55:91–106. Kittel B, Ruehl-Fehlert C, Morawietz G, et al. Revised guides for organ sampling and trimming in rats and mice – Part 2. Exp Toxicol Pathol. 2004;55:413–431. Morawietz G, Ruehl-Fehlert C, Kittel B, Hellmann J. Revised guides for organ sampling and trimming in rats and mice – Part 3. Exp Toxicol Pathol. 2004;55:433–449.















