腺病毒(adenovirus)是一种没有包膜的直径为70~90 nm的颗粒,由252个壳粒呈廿面体排列构成。每个壳粒的直径为7~9 nm。衣壳里是线状双链DNA分子,约含4.7kb,两端各有长约100 bp的反向重复序列。由于每条DNA链的5'端同相对分子质量为55×103Da的蛋白质分子共价结合,可以出现双链DNA的环状结构。
腺病毒(Adenovirus)是目前最高效可靠的重组病毒表达系统之一,可用于在哺乳细胞中瞬时及高水平地表达shRNA或目的蛋白。其具备以下优点:
1. 宿主范围广。腺病毒可感染一系列哺乳动物细胞,除可感染几乎所有人的细胞类型外,还可感染包括大鼠、小鼠、兔、猪、羊、猴、鸡等物种。
2. 因腺病毒的感染不依赖细胞周期,故其既可以感染增殖细胞也可以感染非增殖细胞。
3. 腺病毒具有嗜上皮细胞特性,因大多数肿瘤细胞均属于上皮细胞,这使得腺病毒非常适合应用于基因治疗领域。
4.病毒滴度高,可用于动物水平的实验。
5. 有较好的生物安全性。腺病毒携带的基因不会整合到宿主细胞基因组中;实验中虽然会有一定机率出现RCA(即复制型腺病毒),但由于大多数成人体内都有针对腺病毒的抗体,所以一般危害不大。
拓普生物腺病毒包装技术特点:
(1)采用5型E1/E3缺陷型腺病毒,生物安全性更高;
(2)最新的AdMAX系统,病毒生产更快捷;同时也有AdEasyTM系统可供选择。
(3)提供溶瘤腺病毒包装服务;
(4)有多种过表达和shRNA腺病毒穿梭载体;
(5)可带有荧光标记基因(GFP、RFP、YFP等),有多种启动子可更换;
(6)包装空间大,最高可插入8K目的基因。
(7)采用柱纯化工艺,纯度更高,滴度高达1010~1011 pfu/mL。