大家都爱看!小鼠肺原位注射

Time:2024-04-19
肺原位注射用于肺局部给药和肿瘤细胞种植

WHO、GIobcan 2020统计报道2020年肺癌新发病例2206771例,占比约11.4%,是2020年癌症病发率的第二位,而肺癌死亡病例为1796144例,占比约18%,病死率排第一位。尽管手术、放疗、化疗和靶向治疗取得了很大进展,但由于在诊断时大多数患者已局部晚期或出现转移,预后仍然较差,5年生存率仅为15%!。医学动物实验是基础实验研究的重要组成部分,更是临床实验及治疗的理论依据和基础。

本期我们将分享小鼠肺原位注射相关知识:
一、肺部解剖

肺原位注射用于肺局部给药和肿瘤细胞种植。
小鼠左肺仅有1叶,右肺有4叶,分为右前叶、右中叶、右后叶和较小的腔后叶。因此,进行局部给药和肿瘤细胞种植时通常选择左肺。
小鼠左肺侧位体表位置:冠状面在左肩关节水平线以下,横截面以左上臂后缘为中心。

二、注射所需器械与耗材

器械与耗材:
(1)29G胰岛素注射器
(2)标尺
(3)眼科剪
(4)眼科镊
(5)细胞染色液
三、操作方法

(1)距离针尖5mm处,将针头弯曲约90°

(2)将小鼠麻醉,然后右侧卧固定,备皮消毒;

(3)于腋中线上、肋缘和肩锁关节中间部位,将皮肤作1cm开口;

(4)钝性分离皮下组织,明显可见左肺轮廓;

(5)注射器中吸入20-50ul细胞混悬液;

(6)将胰岛素注射器针头完全垂直通过肋间刺入肺中;

(7)注射细胞,静止数秒后拔针;

(8)闭合创口,消毒,待小鼠苏醒。

四、结果展示

分别注射25ul和50ul染色液,注射后解剖可见肺部明显液体蓄积。


五、注意事项

(1)注意针头不刻意下压,以免贯通左肺肺叶;

(2)由图可见,注射量不宜超过50ul,为了保证注射物可以局限在左肺叶内,应适当降低注射量;

(3)小鼠周龄也是影响注射量的原因之一。
六、常见模型案例

小鼠原位肺癌模型构建:选择C57BL/6小鼠,6~8周,雌性,体重约22g。LLC细胞计数板计数及配制2×107/MLLLC细胞无血清悬液0.2ML,在 SPF 级手术间操作,腹腔注射浓度为4%的水合氯醛溶液麻醉(麻醉用量为小鼠体重的1%),小鼠右侧卧位,定位于小鼠左侧腋下以碘伏消毒并备皮,再次消毒后行1cm切口,钝性分 离 至 肋 骨 表 面,可 见 明 显 呼 吸 及 肺 脏 活动,在肋骨上缘1ml注射器垂直穿刺约3mm,缓慢注射细胞悬液约50μl并停留3~5s迅速拔针,观察数秒是否气胸形成,呼吸如常,碘伏再次消毒以细丝线单纯间断缝合2针。

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