气管滴注/气管插管这一给药方式具有给药量准确、动物应激小等优点而广泛应用于肺相关疾病造模。常见的慢阻肺造模方法有:
如何进行气管滴注?
Step1:滴注前准备
动物:♀ ♂均可,6-8w,balb/c、C57BL/6J均可其他用品:麻醉机(含异氟烷)、鼠板、10-100ul移液枪、棉签、小鼠压舌灯、镊子、皮筋等。
Step2:将动物置于诱导箱中麻醉,然后放在鼠板上用皮筋固定门齿和腹部(皮筋可以用乳胶手套上的那根,柔软且弹力适中)。
Step3:镊子拉出小鼠舌头,插入棉签,以沾干口腔内的唾液,否则过多的唾液容易遮挡视线,不利于观察到开合的声门。
Step4:手指捏住舌头,伸入压舌灯,观察声门开合的位置
Step5:向声门缓慢滴加10-40ul药物
Step6:药物滴加完成后,用无针头的注射器从鼻孔向下缓慢推大约500ul空气,使药物均匀分布。
Step7:将给药后的鼠放在耳边,可听到清晰的呼吸音,类似于人咳嗽或“咯痰”声,说明给药成功。鼠放回鼠笼,1min内即可苏醒。
模型评价
以黑墨水示意药物分布,可以看到左右肺叶均有着色。
根据药物毒性或小鼠对药物的反应不同可以发现,有的小鼠在给药后会出现体重下降、毛发凌乱等问题,这些现象也可以从侧面反映出药物对小鼠发挥了作用。
取材
分子水平 | 肺泡灌洗液 | 检测细胞因子,如IL-4,IL-5,IL-10,IFN-r等水平,反应炎症水平 |
病理水平 | 肺叶、气管 | HE染色,直观 |
小tips:
小鼠在自然体位下,食管和气管是并行的,食管贴近背部,气管贴近胸部,因此在灌胃时需要灌胃针从嘴角进针,贴住上颚然后下行。而气管给药时需要向胸部贴近才能看到声门。给药工具除了移液枪外,还可以选择灌胃针进行气管给药,此时灌胃针在气管中上下移动时可感觉到气管没有食管那么光滑,进而进一步判断给药位置。