不同配方的 Matrigel胶可以满足不同的实验要求,参考如下:
a、低生长因子(GFR)的Matrigel基底膜基质胶适用于对基质成分要求严格的实验,如细胞信号通路和细胞因子的研究等;
b、不含酚红的Matrigel胶适用于荧光检测或显色反应等分析;
c、高浓度的Matrigel胶适用于研究血管生成、肿瘤细胞迁移和体内肿瘤模型的建立等
1. 体外实验
(1)细胞侵袭实验
运用小室建立体外模型,在上室铺上一层Matrigel胶,再接种细胞,肿瘤细胞粘附于Matrigel胶,通过对Matrigel胶的降解作用,使其能够穿过Matrigel胶和滤膜到达下室侧滤膜。该实验能够更加真实地模拟肿瘤细胞侵袭过程。
(2)类器官培养
将适当的多能干细胞或者特定组织的祖细胞嵌入Matrigel胶或者其他适当的细胞外基质中,培养基则使用含有特定生长因子的细胞培养基模拟维持干细胞群所需的体内信号。在此生长条件下,嵌入的细胞增殖并自我组织成3D类器官结构,并在许多系统中可进行无限期传代和维持培养。
(3)细胞生长
适用于极化细胞的培养,如表皮细胞;也可促进多种细胞的繁殖,如肝细胞、内皮细胞、平滑肌细胞。
(4)干细胞研究
在无小鼠胚胎纤维元滋养细胞环境下,维持和扩展非分化胚胎干细胞。
(5)血管生成实验
该实验能很好的模拟肿瘤的血管发生过程,并且适合研究药物对此过程的影响。
2. 体内实验
(1)肿瘤皮下移植瘤模型
使用Matrigel胶可提高成瘤细胞在体内成瘤的比例和速度,还可以使某些单独注射不成瘤的细胞在体内成瘤。
(2)原位模型
利用Matrigel胶在室温下短时间内形成的三维基质结构使肿瘤细胞在原位固定生长,Matrigel胶组分也是肿瘤形成不可或缺的营养成分,有利于肿瘤细胞的快速生长。
三、注意事项
(1)Matrigel在10℃以上即可成胶,在操作过程中,保持Matrigel一直置于冰上,所有接触Matrigel的细胞培养器皿,移液吸头,分装管等都必须预冷后使用哦。
(2)Matrigel基质会有色差变化(淡黄色到深红色),是由于酚红和碳酸氢盐与CO2 作用引起的,与5%CO2 平衡后色差即会减少。冻融后,需轻轻摇晃试剂瓶使Matrigel 分散均匀。
(3)溶解时可将Matrigel 基质置于4℃冰箱内冰上过夜溶解。成胶后的Matrigel可以在4℃ 24-48h后重新呈液态。
参考文献
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