什么是胶质瘤?
很多人对脑胶质瘤不太了解,只知道它是一种肿瘤。其实脑胶质瘤是属于脑肿瘤的一种,但是它的发病率非常的高。据资料显示,患此病的男性多于女性。临床上把脑胶质瘤分为四个级别:Ⅰ级是良性胶质瘤,Ⅱ级是恶性度较低的胶质瘤,Ⅲ-Ⅳ级是高度恶性的胶质瘤。然而,临床上超一半的患者属于Ⅳ级。胶质瘤是大脑和脊髓胶质细胞癌变所产生的、最常见的原发性颅脑肿瘤,亦可以称为神经外胚层肿瘤,或又名神经上皮肿瘤。起源于神经胶质、室管膜、脉络丛上皮、神经元等,占颅内肿瘤40%,病因至今未明。
目前虽采取积极地手术治疗,辅以化疗、放疗和生物治疗等,但疗效不佳,病死率极高,因此迫切需要深入研究其生物学特性,开展新的、有效的辅助治疗。在这些研究中,建立相应的实验动物模型是治疗和研究胶质瘤的关键。
裸鼠皮下胶质瘤模型构建方法
根据肿瘤接种部位的不同,接种方法可分为皮下注射及原位注射等模型,而鉴于原位荷瘤会导致血脑屏障的破裂和反应性脑内伤口的形成还需要精细的操作和仪器,我们选用皮下注射成瘤。先取对数生长期细胞,经胰蛋白酶消化、离心等处理后,计数细胞数,调整到所需细胞浓度,用注射器抽取混匀的细胞悬液,接种于裸鼠右侧背部靠右后肢皮下处,建立裸鼠皮下胶质瘤模型。接种后每日观察裸鼠精神、饮食、排便及活动情况,每隔3 天称质量并用游标卡尺测量并计算移植瘤平均体积,求其平均值并绘制肿瘤生长变化曲线,观察神经胶质瘤的生长情况。接种第36天处死裸鼠取出肿瘤,肉眼观察移植瘤形态、质地、活动度。用福尔马林固定肿瘤组织,包埋,脱蜡,染色,观察病理性特征。
图A将荷瘤的鼠肿瘤切片进行HE染色处理,荷瘤部位染色加深,(图中黑方框圈中的部位),正常组织染色较浅
图B 接种第36天裸鼠胶质瘤组织,肉眼可见肿瘤组织呈结节状、灰白色,大小形态不规则,与周围皮肤不粘连
影响裸鼠成瘤的关键因素
1.肿瘤细胞状态
首先要考虑移植的肿瘤细胞是否能成瘤,其次是细胞接种数量,一般不超过1×107;不同细胞株,剂量不一样,一般是恶化程度越高的,接种数量可适当减少。
2.裸鼠周龄
裸鼠周龄不要小于四周,否则动物耐受度大大降低,容易死亡;也不能周龄太大,否则免疫力会增强,不易形成肿瘤;
3.种植部位
一般选择血供丰富区域,如左侧前肢,血供丰富,容易生长新血管。
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