探秘之小鼠动情期区分实验

发布时间:2024-07-25
探秘之小鼠动情期区分实验

做过繁育相关课题的科研宝子们估计都曾经思考过这样一个问题:怎样才能提高小鼠的繁育成功率呢?有经验的师兄师姐会这样回答:那当然是在小鼠动情期合笼成功率是最高的

本期知识分享将带您探秘小鼠动情周期,并将灵赋拓普生物多年总结出的经验倾囊相授~

 

什么是小鼠动情周期?

小鼠动情周期是雌性小鼠在生殖系统中的周期性变化,通常持续4至5天。这一周期包括了卵泡发育、排卵和子宫内膜准备等过程。与人类的月经周期类似,小鼠的动情周期也是受到内分泌激素的调控,如雌激素和孕激素

 

 

怎样区分动情周期?

1. 生殖器官外观:

小鼠的生殖器官在不同的动情周期阶段也会有所变化,如子宫颜色和大小、卵巢大小等;(不过要观察这些的话,务必是要伤害到鼠鼠了!)

 

2. 行为特征:

小鼠在动情周期的不同阶段会表现出不同的行为特征,如活动性增加、尿液标记物的变化等(这样的观察比较主观,得出的结果也就不那么准确)。

 

3. 阴道细胞涂片:

可以通过取得小鼠阴道内的细胞涂片,观察阴道上皮细胞的形态变化来确定小鼠的动情周期阶段。在动情周期的不同阶段,阴道细胞的形态会发生变化,如核的形状和大小。

 

 

阴道细胞涂片

可以通过取得小鼠阴道内的细胞涂片,观察阴道上皮细胞的形态变化来确定小鼠的动情周期阶段。在动情周期的不同阶段,阴道细胞的形态会发生变化,如核的形状和大小。

 

以下是灵赋拓普生物技术团队分享的一些做的阴道细胞涂片的宝贵经验:

 

1.实验准备

载玻片,棉球,棉棒,显微镊,生理盐水,福尔马林,瑞氏-吉姆萨染液,纯水,中性树脂,显微镜,盖玻片

 

2.涂片制作

a.将显微镊卷上棉絮,卷为米粒大小,沾湿生理盐水,插入小鼠阴道口0.5-1cm,将镊子贴在阴道壁上从里往外刮10次(保持每只鼠同样力度与次数,大鼠则采用棉棒);

b.将镊子棉球放在玻片中央正上空,滴加生理盐水直至有液滴挂在棉球上而不掉落,慢慢转动棉棒使细胞尽可能多的被洗进液滴里;

c.将液滴从拨片中央往四周平铺开来(棉棒不要触碰到玻片,摩擦会使细胞破裂),自然风干。

 

3.涂片固定:

光下转动拨片观察涂片刚好风干后(风干太久会使细胞破裂,影响后续效果)放入4%多聚甲醛中固定10min,用纯水洗净残留的固定液。

 

4.涂片染色:

配置染液前与滴加染液前务必充分摇匀,将玻片残留水分尽量甩干,从旁边滴加染液,用tip头铺平(勿触碰玻片),避光常温孵育10min后(可回收染液,以备观察后还需要复染),清水洗净,镜下观察。

 

5.封片:

镜下观察,细胞均匀,背景干净无杂质,上色程度理想,即可封片,拨片中央滴加中性树脂后盖盖玻片,平放静至过夜后切片盒内保存。

 

涂片区分动情期?

首先我们要知道阴道脱落细胞主要有3 种:白细胞,有核上皮细胞,角化细胞。

 

1.动情前期涂片大部分是有核上皮细胞,偶有少量角化细胞;

2.随着卵泡加速生长,有核上皮细胞逐渐转化成成熟无核角化细胞进入动情期,全部是无核角化细胞或间有少量上皮细胞;

3.随即又开始出现白细胞,而无核角化细胞慢慢减少,此时出现 3 种细胞(白细胞角化细胞有核上皮细胞)同时存在的现象,证明已进入动情后期;

4.随后,角化细胞不断减少白细胞不断增多,转化为以白细胞为主,逐渐进入动情间期;通常见到以角化细胞为主则认为进动情期。

 

以下是我们灵赋拓普生物技术员辛勤劳作的结果,供大家参考: