鼠单克隆抗体制备

   小鼠单克隆抗体是最常见最经典的单克隆抗体，经过特定抗原处理过的B淋巴细胞与骨髓瘤细胞通过细胞融合的方法得到杂交瘤细胞，经HAT培养基筛选、ELISA检测阳性率后得到阳性克隆株，最后进行细胞培养或将细胞注入到balb/c小鼠腹腔中用腹水培养，收集腹水纯化后就能得到单克隆抗体。

鼠单抗制备流程：

1. 抗原准备：原核表达蛋白抗原，或者设计合成多肽并偶联KLH。选择原核表达蛋白抗原的客户，可自己提供纯化好的抗原（纯度>85%），拓普生物也能为你纯化蛋白，从构建原核表达质粒，到获得纯化蛋白。选择多肽偶联的客户，抗原由拓普生物准备，合成。

2.抗原免疫：免疫4只balb/c小鼠，并通过标准程序加强免疫，尾部采血进行ELISA检测，验收标准为血清ELISA>10,000。

3.细胞融合和筛选：显示最佳免疫应答的balb/c小鼠，将其脾细胞和骨髓瘤细胞融合，通过HAT选择性培养基筛选杂交瘤细胞。

4.杂交瘤细胞筛选：有限稀释法对杂交瘤细胞进行筛选，对2-5个阳性母细胞进行亚克隆，并选一个亚克隆做亚型鉴定。

5.单克隆抗体大量制备：选择一个阳性克隆腹腔注射到5只balb/c小鼠进行腹水生产。

6. 单克隆抗体纯化：使用ProteinA/G纯化抗体，并用ELISA检测抗体效价。

我们的优势：

1.拓普生物技术除了能够提供常规的蛋白、多肽抗原的单克隆抗体制备外，我们也擅长小分子抗原的单克隆抗体制备，对于农药、小分子、重金属抗原的偶联和免疫。

2.抗原优质多样：拓普生物原核表达的重组蛋白，纯度≥95%，浓度可达5mg/mL，可溶性好，模拟天然蛋白状态。拓普生物使用专有抗原表位预测软件筛选设计多肽序列，抗原免疫效果好。

3.专业的抗体筛选和纯化技术：拓普生物有Protein A/G纯化抗体技术，也有抗原特异性亲和纯化技术，任你选择！

4.从事抗体生产和定制服务，我们专业！我们承诺，拓普生物的单克隆抗体ELISA效价达到1：64,000以上。对于任何宿主、任何蛋白抗原（纯度>85%）的单克隆抗体服务保证Western blot检测结果呈阳性。

服务列表：

结果展示：

客户须知：

1.客户提供的抗原，要求浓度>85%，分子量>10kDa，浓度最好在1-5mg/mL之间。

2.客户所需要提供的抗原量由免疫方案决定，如需抗原特异性纯化抗体，则需要更多抗原量

3.客户应对所提供的材料及信息负责，如因客户提供的材料及信息不准确而引起的实验延误或经济损失全部由客户承担。