分解脊髓采集法，都听说了吧？

脊髓（spinal cord）呈微扁圆柱体，位于椎管内，为脑干向下延伸部分。脊髓由含有神经细胞的灰质和含上、下行传导束的白质组成。脊髓发出31对脊神经分布到四肢和躯干；同时也是神经系统的初级反射中枢。正常的脊髓活动是在大脑的控制下完成的。

在与脊髓相关的小鼠实验中，对脊髓标本要求的不用决定了采集方法的不同，现在介绍一下冲洗脊髓采集法（此法适用仅需要完整脊髓，无需顾及神经根），此方法快速且损伤小。

一、器械与耗材

5ML注射器，剪刀，镊子，直径10cm培养皿，白色枪头，生理盐水

二、操作办法

（1）将小鼠用二氧化碳安乐死；

（2）将脊柱剪下，前至寰椎-枕骨大孔，后抵腰骶关节；

（3）在寰椎脊髓腔口9点、3点、6点和12点处，纵深剪开0.5mm；

（4）用镊子夹住腰端，取白色枪头稍稍剪开头部，替换5ML注射器针头，将5ML注射器充满生理盐水。于腰椎断端，将枪头部位向近端旋转插入脊髓腔，枪头孔完全插入脊髓腔内2mm；

（5）快速注射，将脊髓完整冲出脊髓腔；

三、结果展示

四、注意事项

 操作时注意保护脊髓。一旦脊髓损伤，将无法被完整吹出。因此绝不可用断颈法处死小鼠，因为这样做必然伤及腰椎，使得冲洗时冲洗液从腰椎脊髓腔破损部位溢出，不能形成有效冲击力。

五、动物脊髓损伤模型分类

1、挫伤型

重物坠击器：Allen AR于1911年使用重物坠击法( WD法) 构建脊髓背侧损伤模型。该技术原理为一定质量的物体从限定高度自由降落，撞击脊髓，其致伤程度可通过控制重物质量和坠落高度来调节，利用该方法能复制出不同程度的脊髓损伤模型。

电磁打击器：通过应用步进电动机、计算机、传感器、脊柱磁夹固定，打击器 ( infinite horizon，IH) 能精确控制打击力度。传感器能直接测量打击装置对脊髓的压力，当达到预先设定的压力时，打击接头会自动撤回，从而避免重物坠击器出现的反弹现象。然而，脊柱固定的多变性是其最大的缺陷。

2、压迫型

在临床中，椎体骨折脱位、爆裂骨折等对脊髓的损伤往往是持续性压迫所致。压迫型脊髓损伤模型往往通过动脉钳夹、丝线环扎/解压、气囊等方式对脊髓造成压迫，与挫伤型脊髓损伤模型的区别在于脊髓存在长时间的挤压。

3、缺血损伤型

制作该模型的方法主要有: 血管栓塞法、血管夹闭法、电凝灼闭法等。王正峰等通过夹闭胸主动脉时间 8、10、12 min 制备小鼠脊髓缺血模型，确定 10 min为最佳夹闭时间，该动物模型可以长期存活，有利于研究脊髓缺血损伤长时间内的动态变化。金华等改良大鼠脊髓缺血再灌注损伤模型，通过电凝肾上腹主动脉发出的椎动脉和结扎肾下腹主动脉 60 min、90 min、120 min 后再灌注，该方法能够有效阻断腰段脊髓血液供应。Chen RK 等通过双极电凝器电凝大鼠脊髓背侧中央静脉制作脊髓缺血损伤模型，该模型较以往单电极能有效限制过度热扩散，减少邻近脊髓组织损伤，模型制作一致性较强。

4、横断损伤型

完全横断或部分横断脊髓损伤模型广泛应用于组织工程脊髓损伤后的再生修复。该模型有利于评估轴突的再生能力和脊髓的功能恢复以及神经递质、神经营养因子等对这一过程的影响及作用。

2012年，胡炜等通过自制定量半横断刀制作大鼠半横断状缺损模型，该定量半横断刀较手术刀更锐利，能有效减少对脊髓对侧的挤压及牵拉伤，同时纵切刀的长度固定，切割的组织长度一致，避免了人为误差，术后观察对大鼠死亡率、电生理检测、组织形态学及运动功能进行对比分析，结果表明经定量半横断刀制备大鼠脊髓半横断损伤模型，制作过程重复性好且制成的模型稳定，是研究脊髓半横断损伤的理想模型。